ПЦР и ИФА тестирование на ВИЧ-инфекцию

При подозрении на вирус иммунодефицита требуется провести лабораторные методы исследования, чтобы определить точный диагноз. Важно понять, что точнее, ПЦР или ИФА на ВИЧ-инфекцию, чтобы определиться с правильным тестированием. Только при выявлении точного возбудителя можно начать качественное лечение, улучшающее качество жизни больного.

Тест на ВИЧ методом ИФА и ПЦР

Когда проводят ИФА (иммуноферментный анализ), выявляют не сам возбудитель, а комплекс антиген-антитело. Это взаимосвязь вирусных частиц и иммунных клеток, которые направлены на его ликвидацию. Так как вирусный микроорганизм содержится в системном кровотоке, для анализа берут венозную кровь. Однако при помощи методики обнаруживаются не РНК ВИЧ инфекции, а антитела, направленные на ее уничтожение. Вирус известен тем, что подавляет иммунную функцию, поэтому не всегда можно обнаружить продукцию иммуноглобулинов, часто бывают ложноотрицательные результаты. Также антитела не успевают вырабатываться при раннем развитии патологии.

Анализ ПЦР (полимеразная цепная реакция) намного более информативен. Он выявляет даже малейшую концентрацию вирусного микроорганизма, многократно увеличивая объем РНК. Поэтому выявляется даже незначительный уровень вируса, содержащегося в венозной крови. Именно тест ПЦР проводят, чтобы обнаружить генетический материал вируса иммунодефицита человека. Он проводится по следующим этапам:

• сбор венозной крови, которую помещают в стерильную, вакуумную пробирку;
• мгновенная транспортировка биологического материала в лабораторию;
• добавление реагентов, помогающих многократно удвоить цепь РНК ВИЧ-инфекции или другого микроорганизма, содержащегося в крови;
• многократное удвоение РНК вируса, то есть из двух молекул получают 4, из 4 – 8 и так до тех пор, пока не удастся выявить точный микроорганизм, оказавшийся в биологическом материале пациента;
• распознание микроорганизма аппаратом, что снижает риск врачебной ошибки, так как лаборант в этом этапе не участвует.

Специфической подготовки к анализу не требуется. Его можно проводить в любое время суток, на голодный или полный желудок. Если ВИЧ-инфекция содержится в организме, она будет выявлена со 100% достоверностью.

С помощью полимеразной цепной реакции выявляется  2 результата на наличие возбудителя:

• отрицательно – возбудитель полностью отсутствует в организме человека, он здоров;
• положительно – инфекция присутствует в крови, пациент заражен.

Если получен положительный результат, рекомендуется повторная сдача анализа. Всегда существует риск ложных результатов, поэтому лучше проводить тестирование несколько раз.

Сравнение ПЦР и ИФА для ВИЧ

Методы иммуноферментного анализа и полимеразной цепной реакции отличаются друг от друга. Врачи рекомендуют выяснять точный генетический материал вируса, содержащегося в крови, только так можно определить диагноз. Сравнительные характеристики исследования представлены в таблице.

Сравнительная категория	ПЦР	ИФА
Степень достоверности	99%	Менее 90%, возможны ложноотрицательные или ложноположительные результаты
Биологический материал для исследования	Кровь	Кровь
Риск ложных результатов	Отсутствует	Присутствует
Определяемый компонент	Генетический материал вируса, то есть РНК ВИЧ-инфекции	Комплекс антиген-антитело, то есть выработка защитных клеток иммунной системой
Срок выполнения	Не более 1 часа	До 3 часов
Выявление стадии развития патологического процесса	Нет	Да, чем меньше иммунных клеток, тем активнее развивается иммунодефицит
Оптимальность, достоверность данных	Через 2 недели после предполагаемого заражения	Через 3-4 месяца после заражения, чтобы могли образоваться антитела
Цена	Высокая	Небольшая
Когда возможны погрешности	Злокачественное новообразование, аутоиммунные патологии, хронические инфекции	Небольшое количество времени после заражения, онкология, аутоиммунные заболевания, продолжительные инфекции вирусной природы

Каждый из методов имеет положительные и отрицательные стороны. Именно их учитывает врач, когда назначают один из методов для проведения анализа. Если есть возможность ложноположительных и ложноотрицательных данных, рекомендуется проводить тестирование несколько раз.

Какой метод точнее и достовернее

Врачи рекомендуют проводить именно ПЦР-методику, чтобы определять ВИЧ. Это связано со следующими данными:

• наиболее высокая точность, то есть даже при выявлении 1 молекулы вируса ее можно многократно удвоить, чтобы поставить диагноз с высокой достоверностью;
• универсальное применение для разных видов биологических жидкостей и тканей, так как вирус проникает в каждый орган и систему (слюна, кровь, слезная жидкость, соскоб с внутренних органов), но на ранних этапах ВИЧ-инфекция концентрируется именно в системном кровотоке;
• определяется не только вирус иммунодефицита, но и одновременно несколько видов заболеваний, которые могут присутствовать в организме человека из-за осложнений (бактериальное, вирусное, грибковое заражение);
• скорость выполнения оптимальна, диагноз ставится в течение 1 суток;
• данные достоверны, чтобы исключить риск неправильного сбора материала, врачебной ошибки, рекомендуется проводить анализ дважды;
• ранняя диагностика, ВИЧ-инфекция распространяется по всему организму не мгновенно, но первоначально она попадает в системный кровоток, поэтому она выявляется даже в течение первого месяца после заражения;
• отсутствуют возрастные ограничения, тестирование проводится как для младенцев, так и для пожилых людей, возраст не имеет значения (противопоказания по возрасту тоже отсутствуют).

ИФА-метод используется только в том случае, когда прошло уже достаточное время, чтобы появились антитела. Если лаборатория оснащена только этим аппаратом, рекомендуется проводить анализ многократно, если присутствует риск заражения. Только так можно получить достоверный результат. Например, перед первым анализом антитела еще не выработались (тест показал отрицательный результат), перед вторым – уже сформировались, поэтому ВИЧ обнаружен.

ПЦР методика намного более информативна, может выявить распространение микроорганизма в кровь человека через 2 недели после предполагаемого контакта с зараженным человеком. Результат будет оптимальным и достоверным, повторные тесты требуется только в случае получения положительных данных или в случае полового контакта с зараженным.

ПЦР на ВИЧ отрицательный, а ИФА положительный – почему?

Часто бывает, что вирус иммунодефицита человека в крови концентрируется в минимальных дозах. Однако иммунная система реагирует на это состояние, поэтому вырабатывают специфические антитела. Именно из-за этого ПЦР бывает отрицательным, так как искомая молекула РНК вирусного микроорганизма не найдена. Но иммунитет начал выработку иммуноглобулинов, направленных на уничтожение вирусного материала. Поэтому иммуноферментный анализ оказывается положительным.

Данные свидетельствуют о том, что в крови пациента может располагаться вирус иммунодефицита. Требуется многократно проводить анализ на разных аппаратах, чтобы с точностью определить диагноз и своевременно начать лечение.

Источники:

1. Литусов Н.В. Вирус иммунодефицита человека. Иллюстрированное учебное пособие. Екатеринбург: УГМУ, 2018.

2. Эпидемиология ВИЧ-инфекции и ВИЧ-ассоциированной патологии: учебное пособие для врачей/сост.: Т. А. Баянова, А. Д. Ботвинкин, Ю. К. Плотникова, В. В. Бородина; ГБОУ ВПО ИГМУ Минздрава России. Иркутск: ИГМУ, 2013.