Существуют 3 метода определения группы крови и резус-фактора. К ним относят применение цоликлонов, стандартную методику, перекрестный способ. Выбор зависит от оснащенности лаборатории, профессиональных умений врачей-лаборантов.
Методики выявления группы и резус-фактора
Показатели выявляют при помощи 2 методов:
- первичная диагностика (выявление цоликлонов);
- вторичный лабораторный анализ (стандартный, перекрестный способ).
Все виды лабораторных исследований относятся к экспресс-диагностике. То есть их выполняют в течение короткого времени, чтобы успеть помочь человеку. Однако метод цоликлонов не учитывает антигены Келл, поэтому его применяют только в экстренных случаях, когда требуется быстрая трансфузия крови. В остальных случаях используют стандартную или перекрестную методику. Они более информативны.
Определение показателей цоликлонами
Всего выделяют 3 типа цоликлонов для проведения реакции:
- анти-A;
- анти-B;
- анти-D.
Это современная и простая методика, основанная на циклонах. Они являются моноклональными антителами. В ходе проведения реакции используют 3 типа цоликлонов, раствор хлорида натрия 0,9%, медицинский планшет и стеклянную палочку.
Методику проводят поэтапно:
- берут стерильный планшет, на который наносят цоликлоны типа A, B в концентрации 0,1 мл;
- внесение цоликлонов должно соответствовать указанным на планшете надписям;
- к внесенным реагентам добавляют по 2 капли биологической жидкости пациента;
- жидкости перемешивают, наблюдая за ходом реакции;
- смотрят, в какой лунке планшета образовалась реакция агглютинации в виде выпадения осадка в форме хлопьев (на это может потребоваться до 3 минут).
В ходе проведения реакции может появиться реакция агглютинации или она вовсе будет отсутствовать. Поэтому врачи дают следующие расшифровки:
- осадок в лунке с цоликлоном типа A – у пациента наблюдается 2 группа крови;
- выпадение осадка в лунке, содержащей анти-B моноклональные антитела – 3 группа;
- одновременное выпадение осадка в лунке с анти-A и анти-B цоликлонами – 4 группа;
- полное отсутствие реакции агглютинации в любых лунках – 1 группа.
В отдельную группу лабораторных методов входит проведение анализа с цоликлоном анти-D. Эта методика позволяет выявить наличие или отсутствие резус-фактора. Если произошла реакция агглютинации, анализ будет положительным. При отсутствии эффекта тестирование отрицательно, то есть резус-фактор отсутствует.
Стандартная методика определения показателей
Реакция тоже основана на агглютинации, то есть склеивании эритроцитов. Если она формируется, на дне лунки будет образовываться осадок, а поверхность жидкости останется прозрачной. Для проведения теста берут следующие реактивы и устройства:
- сыворотки различных групп крови (0, A, B);
- планшет, который лаборант предварительно маркирует;
- изотонический раствор 0,9%;
- стеклянная стерильная палочка для перемешивания раствора.
Чтобы определить показатели, методику проводят поэтапно:
- внесение фамилии и инициалов пациента непосредственно на планшете, чтобы не перепутать образцы;
- внесение стандартных сывороток и всех групп крови по 1 капле;
- забор венозной биологической жидкости, которую центрифугируют, чтобы получить сыворотку;
- 6 капель сыворотки переносят на планшет, при помощи стеклянной палочки перемешивают раствор, дожидаются реакции;
- выявляют наличие или отсутствие реакции агглютинации;
- если в какой-либо лунке произошло склеивание эритроцитов, дополнительно вносят по 1 капле изотонического раствора.
После проведения анализа следят за изменением цвета или выпадением осадка. Если кровь принадлежит к соответствующей группе, на дне происходит реакция агглютинации. Ее можно ожидать в течение 5 минут. Если реакция отсутствует, склеивание эритроцитов не происходит, раствор остается идентичного оттенка. Для расшифровки полученных реакций используют следующие данные:
- наличие агглютинации в сыворотке во всех лунках – 4 группа крови;
- если склеивания происходит только в одной лунке, кровь принадлежит к маркируемому образцу, указанному на планшете.
Если склеивание эритроцитов произошло сразу на всех лунках, рекомендуется заново повторить анализ, чтобы не допустить ложноотрицательных или ложноположительных результатов.
Перекрестная методика
В перекрестной методике также определяют антигены типа A и B. Для этого используют изогемагглютинирующие сыворотки, соответствующие антителам стандартных эритроцитов.
Биологическую жидкость пациента прокручивают на аппарате на высоких оборотах, чтобы получить сыворотку. В лунки вносят по 1 капле жидкости, добавляют стандартные эритроциты каждого вида крови. Оценивают наличие или отсутствие схлопывания эритроцитов. Если оно произошло, дополнительно добавляют хлорид натрия.
Далее врач смотрит, в какой лунке сформировался осадок. Если реакция наблюдается во всех трех лунках, пациент обладает 4 группой. В остальных случаях смотрят на маркировку, чтобы определить принадлежность.
Потребность в определении показателей
Обычные люди не всегда осведомлены, какими свойствами крови они обладают. Если развивается чрезвычайная ситуация, при которой требуется переливание биологической жидкости, обязательно проводят анализ для выявления этих показателей. Однако некоторые пациенты интересуются данными своего организма самостоятельно. Поэтому врачи выделяют следующие показания для обнаружения свойств крови:
- тяжелая травма, приводящая к обширному кровоизлиянию;
- подготовка к операции или экстренное хирургическое вмешательство;
- потребность в переливании при хронической кровопотере, вызывающей анемию;
- планирование или наступление беременности (причем, исследование проводят для обоих родителей).
Если речь идет о переливании крови, всегда выявляют показатели группы и резус-фактора. Допустимо переливание биологической жидкости для реципиента, которая в точности соответствует показателям донора. Иначе наступит гемолиз (склеивание) эритроцитов, гибель пациента из-за тяжелой гипоксии внутренних органов.
Проведение тестирования при планировании и наступлении беременности требуется для сохранения жизнедеятельности плода в случае, если параметры между ним и женщиной не совпадают. Может возникнуть реакция отторжения зародыша, вызывающая самопроизвольный аборт или преждевременные роды. У многих новорожденных формируется резус-конфликт, провоцирующий гемолитическую болезнь. Своевременное выявление показателей поможет предотвратить это состояние, провести лечение.
Определение обоих показателей крови – важнейшее исследование, проводимое в лаборатории. Его используют для идентификации биологической жидкости в стандартных или экстренных медицинских ситуациях. Если пациенту требуется переливание или у новорожденного наблюдается гемолитическая болезнь, правильное проведение исследования поможет спасти жизнь.
Источники:
- Физиология крови для студентов КРИ: учебное-методическое пособие / В.А.Лавриненко, А.В.Бабина: Новосибирск, 2015.
- Особенности определения групп крови и резус фактора / О.П. Сомова: ГБУЗ Волгоградский Областной Уронефрологический Центр.
- Переливание компонентов крови и кровезаменителей: учебно-методическое пособие / С.А. Афендулов, Г.Ю. Журавлев: Тамбов, 2010.
Отзывы о статье: Методы исследования группы крови