Определение группы крови методом стандартных сывороток

Определение группы крови методом стандартных сывороток – один из основополагающих анализов, позволяющих выявить свойства биологической жидкости. Это специфический анализ, проводимый только в медицинских лабораториях.

Он помогает не только узнать все про кровь человека, но и своевременно спасти пациенту жизнь. Чаще тестирование проводят экстренно, но бывают случаи, когда анализ выполняют по физиологическим показаниям. Например, при беременности.

Важность проведения исследования

Методы определения группы крови стандартными эритроцитами используют в частных и государственных медицинских учреждениях. Выделяют следующие показания, при которых необходимо провести анализ:

• хирургическая операция или получение травмы, приводящей к обильному кровотечению;
• подготовка к зачатию или наступлению беременности;
• хронические кровопотери, вызывающие недостаток эритроцитов и ОЦК (например, при язвенной болезни желудка, маточных кровотечениях);
• резус-конфликт матери и новорожденного.

В основном определение показателя требуется перед плановыми операциями. К ним относятся любые хирургические вмешательства, так как всегда есть риск развития кровотечения после повреждения ткани, даже если оно небольшое. Пациенту может потребоваться переливание крови, которая должна строго соответствовать по всем параметрам с донором, иначе можно спровоцировать обширный гемолиз эритроцитов с последующим летальным исходом.

Метод получения стандартных эритроцитов

Для проведения анализа требуются стандартные эритроциты. Чтобы получить их, проводят поэтапные действия:

• берут венозную кровь у доноров, обладающих 1, 2, 3 группой;
• отмывают биологическую жидкость, проводят центрифугирование на высоких оборотах, чтобы получить сыворотку и взвесь эритроцитов;
• жидкую часть удаляют, оставляют только эритроциты, к которым добавляют хлорид натрия, тщательно перемешивают;
• проводят повторное центрифугирование, опять удаляют жидкую часть;
• добавляют физиологический раствор;
• в третий раз проводят отмывание;
• консервируют полученные продукты при помощи химических веществ, хранят в холодильнике не более 2 месяцев.

Как только полученные образцы переходят завершающий этап срока годности, их выбрасывают. Затем методику требуется повторять заново, чтобы опять получать стандартные эритроциты.

Реагенты для проведения анализа

Чтобы выявить свойства биологической жидкости, требуется первоначально подготовить следующие компоненты:

• планшет, на котором в дальнейшем подписывают образцы стандартных эритроцитов и данные пациента;
• стандартная изогемагглютинирующая сыворотка и эритроциты;
• изотонический раствор, 0,9%;
• стеклянная палочка для перемешивания образца.

Все компоненты обладают небольшой стоимостью, поэтому проведение методики не требует больших затрат со стороны медицинского учреждения.

Суть метода

Чтобы определить принадлежность крови к определенной группе, предварительно отмывают взвеси эритроцитов. Это стандартные образцы, на поверхности которых содержатся агглютиногены A или B. Эти данные заранее известны, они помогают выявить наличие агглютининов альфа и бета.

Суть метода заключается в предварительном нанесении перед каждой лункой номера или названия стандартной сыворотки. Если после внесения биологической жидкости пациента происходит реакция агглютинации – в образце присутствуют идентичные агглютинины. То есть при наличии реакции напротив A (1) лунки кровь пациента будет обладать одноименными свойствами, принадлежать к первой группе.

Ход проведения

Процедура определения параметра проходит поэтапно:

• предварительно врач подписывает планшет (ФИО пациента), на котором будет производиться анализ, чтобы не перепутать образцы;
• указание обозначения стандартных сывороток 1-3 группы;
• внесение сыворотки в концентрации 0,5 мл или 2-3 капли;
• забор крови пациента из вены, так как в ней сосредоточено максимальное количество эритроцитов;
• добавление антикоагулянта к изъятому образцу, чтобы биологическая жидкость не успела свернуться;
• центрифугирование образца на высоких оборотах, чтобы получить плазму;
• перенесение плазмы на планшет при помощи стеклянной палочки, перемешивание;
• наблюдение за появлением или отсутствием склеивания эритроцитов (при положительной реакции выпадает осадок в виде хлопьев, а сверху остается полупрозрачная жидкость);
• в лунку, где произошло склеивание, добавляют несколько капель хлорида натрия 0,9 %.

Чтобы дождаться завершения реакции, достаточно 30-40 секунд. Для остальных способов временной промежуток может длиться вплоть до 5 минут. Поэтому методика со стандартными сыворотками более быстрая.

Расшифровка

По методу склеивания эритроцитов выделяют 2 вида положительных анализов:

• в форме песка;
• в форме лепестков.

Если реакция не произошла, оттенок раствора не меняется. Он остается красным. На одном планшете выделяют лунки, где должны происходить реакции одной серии. Если анализ точный, в обеих лунках будет идентичный результат.

Определение показателя обнаруживают в зависимости от наличия или отсутствия склеивания эритроцитов в соответствующих лунках:

• выпадение осадка на лунке с маркировкой A – вторая группа крови;
• формирование реакции с маркировкой B – третья;
• полное отсутствие реакции, раствор остается идентичного оттенка – четвертая;
• наличие склеивания эритроцитов сразу в двух колонках с маркировкой A и B – первая.

Если реакция полностью не произошла или образовалась сразу в двух лунках, рекомендуется проводить повторное исследование. Это поможет исключить риск неточных данных, врачебной ошибки.

Выделяют 4 варианта получения результатов.

1. Результаты 0 (1). Первая лунка является контрольной, по ней сверяют полученные данные. Во второй лунке наблюдается осадок в виде хлопьев, так как агглютиноген встретил одноименное вещество. В третьей лунке агглютиноген входит в реакцию со схожим компонентом, выделяя осадок. Так как реакция происходит сразу с двумя компонентами, данные соответствуют первой группе.
2. Результаты A (2). Агглютиноген B не входит в перекрестную реакцию, осадок не выделяется. Однако агглютиноген A встречает идентичный компонент, формируя хлопья. Так как в образце пациента присутствует агглютинин альфа, это свидетельствует о наличии второй группы.
3. Результаты B (3). При прочтении лунок слева направо выясняется, что агглютиноген альфа не вступает в реакцию, раствор остается прежним. Но агглютиноген B обнаруживает идентичный компонент в плазме крови пациента, поэтому выделяется осадок.
4. Результаты AB (4). При чтении планшета слева направо выявляют хлопья сразу в двух колонках, содержащих агглютиноген альфа и бета. Это означает, что у пациента присутствует сразу 2 вида антигена на поверхности эритроцитов.

В ходе определения группы крови стандартным методом лаборанту требуется не только владеть методикой, но и производить качественную расшифровку. Любой неверный шаг может вызвать неправильное толкование анализа, что приведет к врачебной ошибке. При переливании крови у пациента наступит массовый гемолиз эритроцитов, что спровоцирует смерть. Поэтому важно в точности определять показатели в зависимости от выбранной методики.