Подсчет количества тромбоцитов в крови - подробно о методиках

Тромбоциты — красные кровяные тельца, которые циркулируют в крови в большом количестве. Они необходимы для формирования сгустков, которые закупоривают повреждения в сосудах. При возникновении заболеваний или нарушений число показателя может быть снижено (тромбоцитопения) или повышено (тромбоцитоз). С помощью общего анализа крови с подсчетом тромбоцитов можно выявить это нарушение вовремя и провести лечение.

Когда нужен анализ крови с подсчетом тромбоцитов?

Клинический анализ крови с подсчетом тромбоцитов проводится в следующих случаях:

• диспансеризация человека с проведением общего анализа крови для профилактики появления различных заболеваний;
• симптомы повышенного количества тромбоцитов, вследствие которых может произойти закупорка сосуда (повышенное давление, онемение конечностей);
• клинические проявления сниженного количества кровяных пластинок (постоянное появление синяков и гематом, бледность кожных покровов);
• проведение повторного анализа, если первый тест показал нарушение.

Во всех перечисленных случаях необходимо обратиться к врачу для проведения общего осмотра. Он назначит методику, которая будет наиболее приемлемой для пациента, чтобы правильно поставить диагноз.

Методы подсчета тромбоцитов в крови

Выделяют три методики для подсчета кровяных пластинок в капиллярной крови:

• использование камеры Горяева;
• методика по Фонио;
• использование полуавтоматического анализатора.

Все методики применяются в клинических учреждениях. Каждая из них имеет положительные и отрицательные стороны. Возможен подсчет тромбоцитов ручным методом для просмотра их формы и размера. Если врач будет сомневаться в точности результата, он может назначить подсчет клеток с помощью полуавтоматического анализатора.

Унифицированные методы подсчета тромбоцитов

Унифицированными является методики, которые считаются более точными. Для подсчета кровяных пластинок таким тестированием является методика по Фонио и применение камеры Горяева.

С помощью анализов можно не только почитать точное число клеток, но и изучить их строение. Возможно определение раковых атипичных клеток.

Ручной подсчет тромбоцитов в крови

К анализам с ручным подсчетом тромбоцитов относятся использование камеры Горяева и метода по Фонио. Для обоих исследований осуществляется подсчет тромбоцитов в мазке под микроскопом. Полученные цифры подставляют в формулу, с помощью которой результат из 1 мкл переводится на 1 л крови.

Подсчет тромбоцитов в камере Горяева

Для подсчета тромбоцитов по методике Горяева необходимо приготовить раствор, состоящий из следующих веществ:

• реактив 1 (кокаина гидрохлорид 3 г, натрия хлорид 0,25 г, фурацилин 0,25 г, дистиллированная вода 100 мл);
• Реактив 2 (раствор оксалата аммония 1%).

Чаще всего применяют раствор оксалата аммония. Он эффективно уничтожает эритроциты, возможен свободный подсчет кровяных пластинок.

Рекомендуется для исследования выбирать венозную кровь. При использовании капиллярной биологической жидкости повышается риск образования сгустка. Если произойдет агрегация тромбоцитов, корректный подсчет количества тромбоцитов будет невозможен. К крови добавляют раствор ЭДТА, который препятствует образованию сгустка.

В пробирку наливают 0,02 мл крови, добавляют 4 мл реагента 1 или 2. Получившуюся массу перемешивают. В течение 30 минут должен произойти полный гемолиз красных кровяных телец. Пипеткой отбирают полученную жидкость, добавляют в камеру Горяева.

Внимание! Для осаждения кровяных пластинок камеру Горяева с жидкостью помещают во влажную среду. Кладут счетную камеру под микроскоп и подсчитывают форменные элементы.

Тромбоциты считают в 25 больших квадратах. Для этого микроскоп перемещают слева направо, вниз, справа налево. Кровяные пластинки под микроскопом выглядят, как небольшие фиолетовые точки.

Полученное значение подставляют в формулу подсчета тромбоцитов в мазке:

X=a×250×200/25

• X – число тромбоцитов на 1 мкл биологической жидкости;
• a -  количество тромбоцитов в 25 квадратах;
• 200 – разведение крови;
• 25- количество квадратов;
• 1/250 – объем одного квадрата.

После завершения методики все используемые приспособления дезинфицируют с помощью этилового спирта.

Подсчет тромбоцитов в мазке крови (по Фонио)

Для методики используют капиллярную кровь, взятую из пальца. Ее помещают в капилляр, добавляют один из следующих реактивов, препятствующих образованию сгустка:

• раствор ЭДТА 2, 6%;
• раствор сульфата магния 14%.

Жидкость необходимо тщательно перемешать. Каплю разведенной крови добавляют на предметное стекло, размазывает пластиковым шпателем. Полученный мазок фиксирует с помощью метода по Романовскому-Гимзе.

Важно! Время фиксации зависит от применяемого реактива. Для ЭДТА оно составляет 40 минут, для сульфата магния — до 3 часов.

Мазок рассматривают под микроскопом, считают эритроциты и тромбоциты до получения значения, равного 1 тыс. Необходимо перемещать микроскоп слева направо, вниз, справа налево до тех пор, пока не будет достигнута данная цифра.

Для пересчета количество тромбоцитов 1 мкл на 1 литр крови число эритроцитов и тромбоцитов перемножают, делят на 1 тысячу.

Подробно о подсчете тромбоцитов по Фонио.

Подсчет тромбоцитов в анализаторе

Для метода подсчета количества тромбоцитов используют капиллярную или венозную кровь. Добавляет антикоагулянт, чтобы она не свернулась. Если это произойдет, потребуется повторное изъятие биологической жидкости. Жидкость подносят к полуавтоматическому анализатору, который забирает объем жидкости, равный 1 мл.

Прибор самостоятельно подсчитывает данные, выдавая их на бланке исследования. Читайте о домашних анализаторах крови.

Какой способ подсчета тромбоцитов лучше?

С помощью подсчета показателя на мазке возможно визуально определить параметры клеток. Выявляется их размер, форма, патологические образования. Врач может ошибиться при подсчете или прокрасить мазок неправильно. В первом случае возможна постановка ошибочного диагноза. Для его подтверждения потребуется повторное исследование.

Внимание! Полуавтоматический анализатор в точности подсчитывает количество клеток, редко выдает ошибочный результат по этому параметру. Но аппарат не сможет рассмотреть параметры клеток, их атипичность.

Рекомендовано сначала проводить подсчет тромбоцитов вручную, затем исследовать их на полуавтоматическом анализаторе.

Ошибки при подсчете тромбоцитов

Возможны следующие ошибки в подготовительном этапе и проведении анализа:

• отсутствие подготовки пациента в виде диеты, ограничения физической активности и времени сдачи исследования;
• использование первой капли крови для проведения анализа (по правилам ее стирают водой, так как в ней содержится большое число форменных элементов);
• отсутствие добавления антикоагулянта, который препятствует образованию сгустка;
• ошибка в покраске мазка (использование просроченных или некачественных реактивов, укороченное или чрезмерно продолжительное время воздействие краски);
• ошибки в подсчете клеток. 

Для идентификации заболевания или его профилактики необходимо раз в год проходить обследование крови. Одним из тестирований является подсчет тромбоцитов. Для этого используют ручной подсчет или применение специализированного аппарата. Обе методики имеют плюсы и минусы, рекомендуется проводить их по очереди для подтверждения диагноза и отсутствия возможной ошибки. После получения данных обращаются к врачу. Только он сможет правильно расшифровать данные, назначив лечение при выявлении нарушений.

Екатерина Беликова, врач лабораторной диагностики, специально для Mirmam.pro

Полезное видео