Общий и дифференцированный подсчёт количества лейкоцитов
Общий подсчет лейкоцитов проводится при исследовании крови. Определяют количество не только белых кровяных телец, но и других форменных элементов. С помощью метода подсчета лейкоцитов можно выявить не только отклонение иммунной системы, но и другие заболевания и состояния. В общем анализе крови определяется количество эритроцитов, гемоглобина, тромбоцитов, лейкоцитарная формула, СОЭ.
Благодаря ОАК выявляются следующие патологические состояния:
- воспалительный процесс;
- нарушение иммунной системы;
- вирусные, бактериальные, паразитарные инфекции;
- анемия или эритроцитоз;
- повышенная или пониженная свертываемость крови.
Дифференцированный подсчет количества лейкоцитов позволяет выявить процентное соотношение их популяции. Проводят исследование на полуавтоматическом анализаторе. Если у врача остаются сомнения, назначают ручное исследование мазка крови. С его помощью можно определить состояние клеток, их внешний вид.
В лейкоцитарной формуле определяются следующие показатели:
- нейтрофилы;
- базофилы
- эозинофилы;
- моноциты;
- лимфоциты.
С помощью общего анализа крови можно не только следить за состоянием иммунной системы, но и выявить другие факторы, вызывающие нарушения в организме. Определяют следующие нарушения:
- наличие бактерий или вирусных агентов;
- аллергические реакции на чужеродный агент;
- присутствие паразитической инфекции;
- появление злокачественной и доброкачественной опухоли.
Определяется не только количественный состав лейкоцитарной формулы, но и наличие молодых или более взрослых клеток. Поэтому говорят о сдвиге формулы влево (к молодым клеткам) или вправо (к зрелым клеткам).
Увеличение количества молодых нейтрофилов может быть в следующих случаях:
- воспаление;
- некроз (омертвление) тканей;
- инфекция;
- отравление;
- приём лекарственных средств;
- временное физиологическое повышение клеток.
Сдвиг лейкоцитарной формулы вправо бывает в следующих случаях:
- лучевая болезнь;
- гиповитаминоз;
- почечная недостаточность;
- печеночная недостаточность;
- временное изменение состава крови после переливания.
Методики подсчета количества лейкоцитов
Существуют разные методики дифференцированного подсчета формулы лейкоцитов. Врач подбирает их в зависимости от оснащённости клиники, предполагаемого диагноза, состояния пациента.
- Дифференцированный подсчет абсолютного количества лейкоцитов по номограмме. Выявляются все разновидности клеток, их процентное соотношение. Определяют повышенное или пониженное значение какого-либо показателя. Отрицательная сторона - не выявляется форма, размер, повреждение клеток. Методика выполняется на полуавтоматическом анализаторе.
- Дифференцированный подсчет отдельных форм лейкоцитов. Анализ необходим при выявлении нарушения в общей формуле лейкоцитов. Врач назначает лечение, с помощью исследования следит за его тенденцией. Выполняется на полуавтоматическом анализаторе.
- Визуальный подсчёт количества лейкоцитов с помощью микроскопа и счётной камеры. Врач визуально подсчитывается количество клеток в заданном объеме жидкости, оценивает их форму, размер, целостность.
Подсчет лейкоцитов в счетной камере
Для подсчета количества лейкоцитарных клеток используется специальная камера, сверху которой накладывается предметное стекло. На углублениях счетного приспособления имеется микроскопическая сетка с большими и малыми квадратами, по которым подсчитывают форменные элементы. Приспособление должно быть стерильным, подготовленным к работе.
Исследование проводится в несколько этапов.
- Полученную кровь для подсчета лейкоцитов разводят в 20 раз с помощью уксусной кислоты.
- Образовавшуюся жидкость набирают с помощью стеклянной палочки, добавляют внутрь камеры.
- Наводят микроскоп, подсчитывает все лейкоциты при его перемещении слева направо, вниз, справа налево. Лейкоциты в крови подсчитывают в 100 квадратах, в моче – по всей сетке.
- Полученные данные подставляют в лейкоцитарную формулу подсчета, вычисляя общее количество лейкоцитов. Это необходимо, так как кровь была разведена.
При просмотре мазка врач не только подсчитывает количество клеток, но и обращает внимание на их внешний вид. При выявлении поврежденных или измененных клеток, это записывается на бланк исследования.
Важно! Подсчёт количества лейкоцитов с помощью камеры может быть использован для крови и мочи.
Подробно о подсчете лейкоцитов в счетной камере.
Растворы и реагенты для подсчета лейкоцитов
Для использования счётной камеры необходимы подготовленные реагенты. Врач должен знать, как приготовить кровь для подсчета лейкоцитов.
- Раствор уксусной кислоты для подсчета лейкоцитов, 3-5 %. Необходим для разведения крови, уничтожения эритроцитов. Красные кровяные тельца могут мешать просмотру лейкоцитов.
- Метиленовый синий. Белые кровяные тельца прозрачны, невидимы без использования специфических реагентов. Метиленовый краситель подкрашивает клетки так, что видна их мембрана и внутренняя структура. Лаборант может рассмотреть гранулы внутри клетки, повреждения, нарушения, атипичность.
- Этиловый спирт необходим для обеззараживания поверхности счётной камеры и предметных стёкол. Перед использованием приспособление протирают, после завершения исследования его полностью погружают в этиловый спирт.
- Дистиллированная вода. Необходима для удаления следов этилового спирта.
Подсчёт лейкоцитов на анализаторе
Для точного расчета всех форменных элементов используют подсчет количества лейкоцитов на гематологическом анализаторе. Он вычисляет клетки в 1 мл биологической жидкости. Выделяют два вида анализаторов:
- кондуктометрический (прибор просвечивает форменные элементы, вычисляя их разные параметры, что позволяет рассчитать эритроциты, тромбоциты, лейкоциты);
- светооптический (вычисляет не только количество клеток, но и их качество).
Для исследования собирают свежую кровь или мочу, выделяют 1 мл. Для подсчёта лейкоцитов необходимо разведение специальными реагентами, которые устраняют наличие эритроцитов. Врач-лаборант закладывает биологическую жидкость внутрь аппарата, который сам подсчитывает форменные элементы. Прибор выдает результат анализа, который отправляют врачу.
Достоинства техники подсчета лейкоцитов:
- снижение риска врачебной ошибки;
- определение большого количества анализов за один рабочий день;
- точность подсчёта клеток.
Отрицательные стороны метода:
- высокая стоимость аппарата, который могут позволить не все клиники;
- отсутствие визуального осмотра состояния клеток.
При подсчете на анализаторе лейкоциты имеют обозначение LEU, выражаются в мкл (микролитрах).
Подсчеты остаточных лейкоцитов
Для оптического просмотра и подсчета количества остаточных лейкоцитов возможно использовать аппарат ADAM. Для этого используют флюоресцентное вещество, которое помечает только лейкоциты. В отношении тромбоцитов и эритроцитов оно не применимо.
Метод выполняется в несколько этапов:
- взятие капиллярной крови;
- обработка биологической жидкости с помощью пропидия йодида, который связывается только с ДНК лейкоцитов (тромбоциты и эритроциты не имеют ядер);
- помещение чипа в аппарат;
- прибор фокусируется на флуорисцентном свечении, производится запись и подсчет клеток, выводится их изображение.
Метод высокоинформативен, так как дает точные результаты. Врач может просматривать изображение клетки в реальном времени.
Подсчет лейкоцитов в мазке
Для методики подсчета лейкоцитов в мазке необходима свежая капиллярная кровь. Её намазывают на предметное стекло сразу после забора биоматериала. Далее производят окрашивание по Романовскому-Гимзе. С помощью метода все клетки фиксируются и прокрашиваются, дальнейшие реакции не происходят.
Подсчет количества лейкоцитов на покровных стеклах осуществляется с помощью микроскопа. Наносят иммерсионное масло, чтобы все клетки лучше просматривались. Микроскоп переводят на иммерсионный объектив.
Клетки в образце располагаются неравномерно:
- по периферии - моноциты и гранулоциты;
- по центру - лимфоциты.
Микроскоп перемещают слева направо, вниз, справа налево. Мазок подсчитывают до тех пор, пока общее количество клеток не достигнет 100 единиц. Данные по каждому виду лейкоцитов заносят на бланк исследования.
Подсчёт лейкоцитов в моче
Осуществляют исследование форменных элементов и других образований в моче с помощью метода подсчета лейкоцитов по Нечипоренко. Для этого биологическую жидкость помещают в пробирку, центрифугируют. С помощью этого метода все образования выпадают в осадок. Его отбирают, переносят в счетную камеру.
Далее производят подсчет эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров в больших и малых квадратах. В норме у здорового человека должно быть не более 2 лейкоцитов на один образец биологической жидкости.
Лейкоцитарная формула - важнейшее исследование, которое позволяет выявить реактивность организма в ответ на попадание инфекционного агента. Болезнь может протекать в скрытой форме, ее можно заподозрить в процессе подсчета белых кровяных телец. Исследование крови позволяет выявить состояние иммунитета, появление воспалительных процессов во внутренних органах. Определение лейкоцитов в моче выявляет нарушения в мочевыделительной системе.
Екатерина Беликова, врач лабораторной диагностики, специально для Mirmam.pro
Полезное видео
Отзывы о статье: Подсчет количества лейкоцитов: какую методику выбрать?